真人番摊官网关注互联网产品管理,交流产品设计、用户体验心得!

举例食用色素的生产 味精的生产工艺流程 维生素 维生素B12 又名

时间:2018-12-25 05:55 来源:未知 作者:admin

  上传学问视频,让学问动起来

  2019年权势巨子考研专业课材料

  避免合同胶葛,专业律师帮您

  IT计较机

  建筑/情况

  法令/法学

  通信/电子

  研究生测验

  经济/商业/财会

  幼儿/小学教育

  办理/人力资本

  汽车/机械/制造

  医学/心理学

  资历/认证测验

  金融/证券

  文学/艺术/军事/汗青

  中学教育

  高考

  举例食用色素的出产 味精的出产工艺流程 维生素的出产 维生素B12 别名氰钴胺素 它的独一来历就是微生物 高档动物和动物均不克不及合成。 第五章、细胞工程 细胞培育手艺是在20世纪初成立源于1907年Harrison 和1910年Careel成立的体外培育组织和细胞的根基模式 也为细胞工程的研究奠基了基

  在本页浏览全文

  11-20页

  21-28页

  举例食用色素的出产 味精的出产工艺流程 维生素的出产 维生素B12 别名氰钴胺素 它的独一来历就是微生物 高档动物和动物均不克不及合成。 第五章、细胞工程 细胞培育手艺是在20世纪初成立源于1907年Harrison 和1910年Careel成立的体外培育组织和细胞的根基模式 也为细胞工程的研究奠基了根本。 1948年 Sandford建立了分离细胞培育法 培育出了遗传外形不异的克隆细胞株 1957年Dulbecoo用胰卵白酶消化处置组织 获得了单层细胞 并进行培育 对细胞工程的成长起到了主要感化 颠末近一个世纪的成长特别是近几十年的勤奋 人类在动物、动物和微生物细胞工程的各个范畴都取得了灿烂的成绩 科学家不只能培育各类细胞和组织 还能从单个细胞克隆出高档动物和高档动物。 细胞工程的根基概念与手艺根基概念 细胞工程 使用细胞生物学的方式 按照人们预定的设想 有打算地保留、改变和缔造遗传物质的手艺 也是在细胞程度研究、开辟、操纵各类细胞的工程。近些细胞工程的开辟和使用次要集中在细胞杂交、快速无性繁衍和细胞育种等。涉及的手艺有 细胞培育手艺、细胞融合手艺、细胞器移植手艺、细胞重建手艺、染色体工程手艺、体外受精和胚胎移植手艺等。在食物工业中使用普遍的是 细胞培育手艺、细胞融合手艺、细胞代谢产品的出产手艺。 手艺 细胞培育手艺 指动物、动物和微生物细胞在体外无菌前提下的发展、繁衍和保留。即将机体某一组织取出 并使其分离成单个的细胞 在体外人工的发展前提下培育 使细胞不竭地发展和增殖。 细胞培育在取材时要颠末严酷的清洗、消毒 有时还要借助某些特定的酶 以达到分离细胞的目标。然后按照各类细胞的特点、配制细胞培育基 对培育基进行灭菌 采用无菌操作手艺 将生物材料接种于培育基中 然后放入培育箱或培育室中 供给各类细胞发展所需的最佳培育前提 如温度、湿度、溶氧、二氧化碳、pH等 当细胞浓度达到必然的生物量时及时收成处置、传代或保藏。 细胞融合手艺 细胞融合手艺是指分歧的细胞在离体前提下彼此接触 细胞膜中双层磷脂分子发生重排 导致细胞归并 染色体等遗传物质进行重组的过程。 该手艺是20世纪60年代成长起来的细胞工程手艺之一。细胞融合现象最后是在动物细胞中发觉 后来逐步成长到动物细胞和微生物细胞 融合方式也获得不竭的改良和成长。 此刻遍及采用聚乙二醇作为促融剂 聚乙二醇具有强烈的吸水性和凝固、沉淀卵白的感化 合用于各类细胞原生质体的融合。动物细胞和微生物细胞不像动物细胞 其外层有坚硬的细胞壁 在融合前需除去细胞壁制成原生质体。细胞融合的方式除了化学法外 还有电击法等。 细胞融合过程发生的变化 致密形态的原生质体细胞在促融剂的感化下 细胞呈现凝结现象 然后一部门凝固细胞的膜发生粘连 继而融合为多核细胞 在培育过程中多核细胞有进行核的融合而成为单核的杂种细胞 而那些不克不及构成单核的融合细胞在培育过程中逐步灭亡。 细胞器移植和细胞重建手艺 细胞是生命勾当的根基单元 它的内部有行使各类功能的细胞器 细胞学家能够像外科大夫实施器官移植手术那样 对细胞进行显微程度下的细胞器移植。此中细胞核移植就是将一个细胞的核放进另一个细胞中去 以缔造一个核质杂种来研究细胞核与细胞质的功能以及彼此关系。 使用核移植手艺获得的远缘核质杂种 为革新老品种、缔造新品种斥地了新路子。 动物细胞工程及使用动物细胞培育手艺概念 是指动物细胞在体外模仿的心理情况下进行发展繁衍的培育手艺 避免了间接从动物体内提取各类无效成分所遭到的资本限制等要素的影响 为在人工前提下节制动物细胞代谢获得代谢产品供给了可能。虽然动物细胞培育手艺在培育工艺、生化反映动力学、反映器设想等方面能够看作微生物细胞培育的扩展和延长 可是因为动物细胞不像微生物细胞那样是一个独立、完整的生物个别 因而培育系统比力复杂 培育手艺以及反映器设想等均有其奇特之处。 细胞培育设备 常用试剂均衡盐溶液 简称BSS 由各类无机盐和葡萄糖等构成的溶液 此中的无机离子是无机离子是细胞的构成成分。它具有维持细胞渗入压 调控培育液酸碱度均衡的功能。常用的Hank’s液和Earle液是两种常用的BSS根本溶液 前者缓冲能力较弱 后者的缓冲能力较强。PBS成分较为简单 也较常用。 培育液 A天然培育液 次要成分有血浆、鸡胚浸出液、水解乳卵白、血清等 此中血清最为常用。 B合成培育液 次要品种有MEM Eagle培育液、RPMI1640培育液等。在进行细胞培育时 可按照细胞的特点和所需的前提选用合适的培育液。目前市售的培育液都是干粉制剂 性质不变 利用便利 只需用高纯蒸馏水将干粉稀释、消融并定容 再用0 22微米的超滤膜过滤除菌即可。别的还要按照需要插手50 10 的灭活血清。 合成培育基的次要成分 氨基酸、维生素、还原性物质 谷胱甘肽、抗坏血酸及L 半胱氨酸等 、核酸衍生物 如次黄嘌呤等 、血清、抗生素等。 抗生素和抗霉素液 A青霉素、链霉素双抗液 将100 104 U的青霉素和1g硫酸双清霉素用200ml Hank’s液充实消融 分装后冷冻和保留于 20 。利用时在每100mL含有15 血清的合成培育液中插手2mL 即成为含有青霉素100U mL及链霉素100ug mL的双抗液。 B抗霉素液 常用的有两性霉素B和制霉菌素。将50mg的抗霉素 消融于500mL的Hank’s液中 配成含有10ug mL的母液利用时的最终浓度为1 5ug mL。 动物细胞培育手艺 指用无菌的方式使动物细胞在报酬供给的前提下发展和发育的手艺。 动物细胞培育所用的材料大都取至动物胚胎或幼龄动物的脏器在无菌前提下取出适量的组织 插手适宜浓度的胰卵白酶或胶原纤维酶以及EDTA等进行消化感化 使动物细胞分离 将分离的细胞进行洗涤并纯化后在培育基中进行原代培育 并当令进行传代培育。 B动物细胞培育自20世纪初成长至今 已成立了从取材、消毒、细胞分离、接种、继代培育、保藏直到扩大培育、特定生物成品出产等一系列尺度的操作法式 为工业化出产动物产物斥地了一条新路子。 原代培育 又称初代培育 各类动物组织都能够进行体外培育 但现实上幼体组织 特别使胚胎组织更容易培育 分化程度低的比分化程度高的容易培育 肿瘤组织比一般组织容易培育 任何动物细胞培育均需从原代培育起头。 包罗 A、取材 要求严酷的无菌操作 B、消化 胰卵白酶和胶原酶等 C、培育 传代培育 又称继代培育 当原代培育成功后 细胞割裂增殖扩展连片 需要对其分手并从头培育 这一过程称之为传代培育。 A传代机会很主要。传代时间过早 细胞产量不足 过晚 细胞发展形态欠安 因而必需把握好机会。 B细胞对酶的消化感化反映纷歧 有的敏感 有的痴钝 应按照分歧细胞的特点 适度控制细胞消化的时间和选择适宜的方式。处置的好 细胞丧失少 浓度平均 发展速度分歧。 规模化培育 A、培育手艺体例 微载体培育、微胶囊培育、微导管培育和液态深层发酵 B、规模培育体例 分批发酵、流加发酵、半持续发酵和持续发酵 C、规模培育步调 筛选细胞系、确定细胞发展前提、放大、中式和扩大出产 步调 A、筛选细胞系 选择一个发展速度高、抗病能力强、专注表达好并出产速度高的细胞株 B、确定细胞的最佳出产前提 分批发酵、流加发酵、半持续发酵和持续发酵 C、放大、中试及扩大出产。 影响动物细胞培育的情况要素 A、培育温度 恒温动物细胞要求比力苛刻 变温动物细胞耐受力还强些。一般哺乳动物细胞要求37 鸡细胞39 42 虫豸细胞25 28 B、pH值 4很窄的范畴。影响很大体求缓冲溶液。发酵过程中的代谢产品 CO2等 影响 要消弭 D、渗入压动物细胞的保留 包罗典范传代法和冷冻保留法 液氮保留法 冷冻保留法液氮保留法 的操作步调 A预保留细胞经消化分离后 插手冷冻庇护剂 含10 血清的培育液中插手10 的甘油或7 10的二甲基亚砜DMSO B按1mL安瓿瓶的量分装细胞悬浮液 封口 min的速度迟缓冷冻至30 然后以15 30 min的速度降至 150 C冻结好的安瓿瓶放入CO2低温冰柜或液氮罐中温度 150 190 此时细胞的心理勾当几乎完全处于遏制形态 能够持久保留。如 70 能够保藏几个月 90 时可达半年以上。 D若是需要苏醒细胞 能够将冷冻的安瓿瓶取出当即放入37 的恒温水浴中 使其快速融化。在加庇护剂的前提下 慢冻速融时保留苏醒细胞的环节。 培育过程中污染的防治 操作过程应十分注重灭菌和无菌操作。 万一发生污染和传染 常用一些抗生素类防治。一般细菌污染 200U mL的氨苄西林或链霉素 真菌延伸 除铲除菌落和菌团外 还应100U mL霉菌素 杀死散落的孢子和菌丝。对于支原体的传染使用100 mL卡那霉素处置。动物细胞融合手艺 细胞融合的诱导 化学诱导法、物理诱导法、生物诱导法 融合细胞的类型 同核体、异核体、多核体、异胞质体 单克隆抗体 淋巴细胞杂交瘤手艺 动物细胞工程在食物及相关范畴中的使用 目前 动物细胞工程的使用范畴次要集中在疫苗、干扰素、激素、酶制剂、单克隆抗体等医药成品的出产 在食物工业及畜牧业的使用也在逐渐扩大 如培育优秀的食用动物品种 人工受精、胚胎移植 、出产生物活性物质和功能性保健食物、以及培育细胞取代动物尝试进行食物查验等。 培育优秀的动物品种 出产生物活性物质 制备单克隆抗体。 动物细胞工程及使用动物细胞 组织 的培育 成长汗青 能够追溯到20世纪初 1902年其时德国的动物学家Haberlant就曾预言“动物细胞具有万能性”。 不久Hanning成功地在培育基上培育出能一般发育的萝卜和辣根菜的胚。 到了30年代动物细胞培育取得长足的进展 1934年美国人White以番茄根为材料 成立了第一个能无限发展的动物组织。 1956年Miller发觉了冲动素 并指出冲动素能强无力地诱导组织培育中的愈伤组织分化出幼苗。 1958年Steward则成功地从胡萝卜的细胞培育平分化出胚状体和整个植株体。 动物细胞的培育方式 与动物细胞分歧 动物细胞具有万能性 即在必然前提下 已分化的根茎叶等组织的细胞 经离体培育后可发育成同乡本一样的完整植株。 动物细胞培育的根基过程 两个环节 A愈伤组织的诱发 愈伤组织是指在天然某人工培育的环境下 由非组织细胞增殖发生的组织 是前进履物细胞培育的根基材料。 B人工诱发愈伤组织的过程 选择合适的动物材料 颠末概况消毒处置 在无菌前提下切取未毁伤或无污染的组织或器官 称为外植体 置于固体养分培育基上 25 28 暗中或低光照前提下培育 则在暗语出发展出非组织化的无定形细胞团 即愈伤组织 。当愈伤组织发展到必然大小后 可朋分转移至新颖固体培育基中继代培育 也可转移至液体培育基中悬浮培育。 细胞的悬浮培育 将愈伤组织转入液体培育基中进行振荡培育 使游离的动物细胞或小一些的细胞团在液体培育基中增殖 并发生代谢产品。 其特点 A能大量供给平均的动物细胞 B细胞增殖的速度比愈伤组织快 C适合大规模培育。 动物细胞的培育基 无机养分物 常量元素和微量元素 一般用蔗糖质量分数2 维生素出格是B族维生素 氨基酸 发展调理物质 次要是动物激素 分两类 一类是发展素 4氯苯氧乙酸萘乙酸NAA和吲哚乙酸IAA等 另一类是细胞割裂素 如冲动素、玉米素和6苄基嘌呤6 BA。 动物细胞 组织 培育的根基过程 预备阶段 选择合适的外植体 包罗大小、部位 灭菌 配制培育基 诱导分化阶段 继代增殖阶段 生根抽芽阶段 移栽成活阶段 影响动物细胞次生代谢产品的要素 离体培育的细胞保留了亲本植株完整的遗传消息 包罗合成次生代谢产品的能力 但大都环境下 很多基因的表达处于封闭形态 这与整个植株能合成次生代谢产品在特定的部位和特定的期间是分歧的。所以要采用一些方式来提高培育细胞中次生代谢产品的含量 从大量的细胞群中诱变筛选其代谢产品基因表达一直处于“开启”形态的少量细胞 并将这些细胞进行大量培育 缔造合适培育前提 使培育细胞的发生次生代谢产品基因表达开启 大量表达 从而提高产量。 高产细胞系的筛选 物理诱变或化学诱变 选育出能较快发展和较高合成次生代谢产品能力的细胞系 金属离子 良多研究报道 次生代谢产品的堆集往往与金属离子具有着必然的相关性 动物激素 起着至关主要的发展调理感化。国际上公认的五大类动物激素 发展素、赤霉素、细胞割裂素、零落酸和乙烯。动物激素严酷讲指动物体内的天然激素 叫内源激素。人工合成激素 叫外源激素 包罗萘乙酸、冲动素、2 二氯苯氧乙酸。诱导子 是一类惹起代谢路子改变或代谢强度变化的物质。包罗 葡聚糖、糖卵白、低分子量无机酸、真菌细胞壁 还有重金属盐类 亲和力或粉碎细胞膜完整性的化合物等。提高动物细胞此生代谢产品的合成率 还应留意采用培育基组合的体例。两段分布培育体例。第一段有益于动物细胞大量发展繁衍 第二段有益于代谢产品出产堆集。 动物细胞 组织 的大规模培育手艺 工业化动物细胞培育系统次要有两大类 悬浮细胞培育系统和固定化细胞培育系统。 a悬浮细胞培育系统适合于大量快速地增殖细胞 但晦气于次生代谢产品堆集 b固定化细胞培育系统则细胞发展迟缓 而次生代谢产品堆集相当较高。 动物细胞融合手艺 包罗 动物细胞原生质体的制备 动物细胞原生质体融合 化学法诱导融合、物理法诱导融合。 杂合体的辨别和筛选 双亲来源根基生质体经融合后发生的杂和细胞 一般要颠末含有渗入压不变剂的原生质体培育基培育 出产细胞壁后再转入适合的培育基中 待发展出愈伤组织后 按常规方式诱导其抽芽、生根、成苗。并进行杂和细胞或植株的辨别和筛选。 辨别筛选方式 A杂和细胞的显微镜辨别 B互补筛选杂和细胞 C采用细胞和分子生物学的方式辨别杂和细胞 D按照融合处置后再发展出的植株的形态特征进行辨别等。 动物细胞工程在食物工业中的使用 在农作物方面的使用 培育新品种作物 改良作物质量 推进作物快速繁衍 脱除作物毒素 人工种子研究。 出产各类食物添加剂 紫杉醇出产实例

  【精品原创】食物生物手艺参考材料,食物与生物手艺学报,食物生物手艺,生物手艺,生物手艺传递,现代生物手艺,生物手艺专业,农业生物手艺学报,农业生物手艺,生物手艺世界

  关注 互联网的一些事 官方微信,回复" 486 " 即可在微信里阅读本篇内容。

  在查找公众号中搜索:织梦58,或者扫描下方二维码快速关注。

围观: 9999次 | 责任编辑:admin

回到顶部
describe